将光标放在智能马达命令窗口中数据尾项的底部。通过移动到数据字符串的顶部并按SHIFT+鼠标左键来突出显示数据。
转到“编辑”“复制”,然后粘贴到Excel电子表格中。
转到“文件”“打开”“转到本地C”,打开“Excel宏”文件夹并打开“宏测试”,打开包含宏的Excel电子表格,以便将数据分隔成列。最小化窗口。
突出显示数据字符串的第一个单元格。
转到“工具”“宏宏…”,突出显示“dispwload”,然后单击“运行”。这将把数据分为时间列、加载列和位移列。
将时间列除以4000(=A1/4000)可获得以秒为单位的时间;将位移除以2500可转换为毫米。
时间列是值最大的列;位移列包含表示压缩的负数。对于负载:从所有值中减去初始负载读数,从零负载开始。然后将数据除以0.8073,得到以牛顿为单位的载荷。
一氧化氮测定:
遵循一氧化氮检测试剂盒说明书中给出的协议。
打开微型读板器:右后打开。
登录计算机并在桌面上打开SOFTmax PRO软件。
在顶部显示(读取)的工具栏上,单击温度计图标并将温度设置为37°C.*等待左上角的读数达到37°C后再执行测试。
在顶部菜单上,单击分析,然后单击设置文件夹,选择目录将弹出,双击SOFTmax PRO 4.0,并在该文件夹中打开基本协议。
再次在顶部菜单上,单击分析,打开基本端点协议。
在Plate#1部分中,单击设置并打开设置菜单。
把波长调到540纳米。
默认5秒后打开自动混音。在第一次阅读之前。
单击右下角的“确定”并关闭“设置”菜单。
单击模板并打开菜单。
通过使用左上角的下拉菜单,单击并将标准、控件、未知项和空白部分拖动到井的每个部分。
设置一系列的标准和未知数以帮助处理数据图。
关闭模板。
单击“读取”并运行实验。
加载程序调整
确定智能马达将施加的总牛顿力(牛顿/外植体乘以6)
将总牛顿力乘以0.8073,然后加3。这将使智能马达读取力的计数。在2100系统中,当两个灯都熄灭时,增加三个指示灯的初始读数。
将加载程序代码中的f=…值更改为在步骤2中找到的值(在下面突出显示)。
活/死分析方案
设备清单:
带荧光染料的活/死分析试剂盒(L3224,分子探针)
荧光显微镜
显微镜载玻片
镊子
手术刀
96孔板
磷酸盐缓冲液(PBS)
100-1000微升带尖端吸管
铝箔
10ml离心管
保温容器
染色液:
使用前,让染色剂加热至室温。
着色剂是光敏的,保持着色剂和混合物不受阳光直射。(关闭文化罩中的灯。)
在两个10 M l离心管中,将化学品与无菌PBS混合至以下浓度:~1μM钙黄绿素AM;8μM乙二聚体-1,4 ml体积:16μl eth。H-1+4毫升PBS和4毫升容量:1微升卡尔。AM+4毫升PBS
包管是铝箔的,用来遮光。
样品制备:
使用移液管,在96孔板的1列中填充PBS(约300微升/孔)
用手术刀和镊子,切一片薄的(<1mm)半月板组织,保持组织顶部和底部的轨迹。
将面巾纸切成上下两半,放入充满PBS的井中清洗。
将组织转移到空白孔中。
用着色剂覆盖每片组织(每个着色剂约100微升)*可能需要更多的着色剂,具体取决于样本大小。
用铝箔包住板,在37℃下培养30-60分钟。
荧光检测:
孵育后,将培养板连同镊子和显微镜载玻片放入保温容器中。
清洗/放置干净的组织样本。
打开荧光灯、电脑和显示器。*荧光灯必须至少保持30分钟。
打开桌面图标DP Controller和DP Manager。
将组织放在玻片上,用10x或20x透镜在显微镜中对齐。
打开快门开关,在红色(死)和绿色(活)荧光下观看(红色约500纳米:设置4;绿色约600纳米:设置3)*由于图像清晰,首先使用红色荧光聚焦。
确保显微镜右上角的滑杆位于中间位置,允许目镜和相机观看。
在DP控制器的“捕捉”选项卡(最左边)下,单击“捕捉”按钮(相机图标)旁边的“播放”按钮(最左边)。
在“捕获”按钮旁边的下拉框中将像素大小减小到1360x1024。
在“强度”选项卡下降低强度,方法是在图形上向右移动箭头(最左边),直到图像清晰为止。
在“拍摄”选项卡下,单击“拍摄”按钮(相机的图片)录制照片 |